冬 葵 果
【鑒別】 (1)本品宿萼表面觀:下表皮星狀毛由2~8個(多由4~8個)細胞組成,單個細胞長50~1140µm,直徑約75µm,壁稍厚;腺毛頭部橢圓形,5~7個細胞,直徑25~38µm。上表皮單細胞非腺毛細長,彎曲或平直,長約至1190µm,壁薄或稍厚。上下表皮氣孔均為不等式。葉肉薄壁細胞含草酸鈣簇晶,直徑6~25µm,棱角較尖。
本品果皮橫切面:外果皮為一層長方形表皮細胞,壁稍厚,外被角質(zhì)層。中果皮由2~3層類圓形薄壁細胞和一層含草酸鈣棱晶的細胞組成,薄壁組織中有大型黏液細胞散在。含晶細胞類圓形,壁厚且木化。薄壁組織中有大型黏液細胞散在。中果皮與內(nèi)果皮間有10余束纖維束,呈環(huán)狀排列。內(nèi)果皮為一列徑向延長的石細胞,呈柵欄狀,側(cè)壁及內(nèi)壁甚厚,木化。
本品粉末淡棕黃色;外果皮表皮細胞表面觀呈長條形,果皮細胞中含眾多草酸鈣棱晶。色素層細胞類圓形,內(nèi)含紅棕色物質(zhì)。柵狀細胞碎片無色,為1列長柱形細胞,壁極厚,中間可見胞腔。
(2)取本品粉末2g,加水20ml,振搖15分鐘,濾過,濾液加活性炭1g,置水浴上加熱15分鐘,濾過,取濾液2ml,加堿性酒石酸銅試液4滴,置水浴上加熱5分鐘,生成棕紅色沉淀;另取濾液2ml,加10%-萘酚乙醇溶液3滴,搖勻,沿管壁加硫酸0.5ml,兩液接界處顯紫紅色環(huán)。
(3)取本品粉末1g,置圓底燒瓶中,加70%乙醇加熱回流2小時,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇10ml使溶解,取上清液2ml通過C18小柱,用蒸餾水5ml洗脫,收集蒸餾水洗脫液作為供試品溶液。另取咖啡酸對照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗,吸取供試品溶液20µl、對照品溶液4µl,分別點于同一聚酰胺薄膜上,以甲醇-水-冰乙酸(3:2:0.1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。
【檢查】水分 不得過10.0%(附錄Ⅸ H第一法)。
總灰分 不得過11.0%(附錄Ⅸ K)。
【含量測定】對照品溶液的制備 精密稱取咖啡酸對照品適量,加無水甲醇制成每1ml含0.03mg的對照品溶液,即得。
標準曲線的制備 精密吸取咖啡酸對照品溶液0.25ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml和4.0ml,置25ml量瓶中,加無水乙醇至5ml,加0.3%十二烷基硫酸鈉2.0ml及0.6%三氯化鐵-0.9%鐵氰化鉀(1:0.9)混合溶液1.0ml,混勻,在暗處放置5min,加0.1mol/L鹽酸溶液至刻度,在暗處放置20min,以相應試劑為空白,照紫外-可見分光光度法(附錄ⅤA),在700nm波長測定吸光度,以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。
測定法 精密稱取本品粉末2.5g,置圓底燒瓶中,加70%乙醇50ml,加熱回流提取2小時,濾過,用70%乙醇20ml分兩次洗滌容器,洗液并入同一圓底燒瓶中,40℃減壓回收溶劑至近干,加適量無水甲醇溶解,并轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,用無水甲醇稀釋至刻度。精密量取5.0ml置10ml量瓶中,加無水甲醇稀釋至刻度,搖勻,避光備用。精密量取0.5ml,置25ml量瓶中,照標準曲線制備項下的方法,自“加無水乙醇至5ml”起,依法測定吸光度,從標準曲線上讀出供試品溶液中含咖啡酸的量,計算,即得。
本品按干燥品計算,含總酚酸以咖啡酸(C9H8O4)計不得少于0.15%。
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