本品為阿莫西林和克拉維酸鉀的混合制劑[阿莫西林(C16H19N3O5S)與克拉維酸(C8H9NO5)標(biāo)示量之比為2 : 1或4 : 1或7 : 1],含阿莫西林(C16H19N3O5S)和克拉維酸(C8H9NO5)均應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%~120.0%。
【檢查】 有關(guān)物質(zhì) 取本品的細(xì)粉適量,加流動(dòng)相A溶解(必要時(shí)冰浴超聲助溶5~10分鐘)制成每1ml中含阿莫西林2mg的溶液,濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液;精密量取適量,加流動(dòng)相A稀釋制成每1ml中含阿莫西林40mg的溶液,作為對照溶液。照高效液相色譜法(附錄V D)測定,用十八烷基硅烷鍵合硅膠(A型)為填充劑;流動(dòng)相A為0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液(pH6.0),流動(dòng)相B為0.01mol/L磷酸二氫鉀溶液(pH6.0)-乙腈(20 : 80),按下表進(jìn)行梯度洗脫;檢測波長為230nm;流速為每分鐘1.0ml。適當(dāng)調(diào)節(jié)流動(dòng)相條件,使阿莫西林峰的保留時(shí)間約為10~15分鐘。取阿莫西林混合雜質(zhì)對照品,加流動(dòng)相A溶解并稀釋制成每1ml中約含2mg的溶液,與含量測定項(xiàng)下的混合對照品溶液等體積混合后,進(jìn)樣測試,色譜圖中克拉維酸峰與前相鄰阿莫西林未知雜質(zhì)峰之間、與后相鄰阿莫西林酸峰之間,阿莫西林峰與相鄰雜質(zhì)峰之間、相鄰各主要雜質(zhì)峰之間的分離度均應(yīng)符合規(guī)定,理論板數(shù)按阿莫西林峰計(jì)算不低于3000。取對照溶液20ml注入液相色譜儀,調(diào)節(jié)儀器靈敏度,使主成分色譜峰的峰高為滿量程的20%~25%;再精密量取上述兩種溶液各20ml,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰,單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液兩個(gè)主成分峰面積之和的1.25倍(2.5%),各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對照溶液兩個(gè)主成分峰面積之和的3.5倍(7.0%)。(供試品溶液中任何小于對照溶液兩個(gè)主成分峰面積之和0.05倍的峰均可忽略不計(jì))。
時(shí)間(分鐘) |
流動(dòng)相A(%) |
流動(dòng)相B(%) |
0 |
98 |
2 |
10 |
98 |
2 |
30 |
70 |
30 |
32 |
98 |
2 |
42 |
98 |
2 |
【含量測定】 照高效液相色譜法(附錄V D)測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液(取磷酸二氫鈉7.8g,加水900ml使溶解,用10%磷酸溶液或氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至4.4±0.1,加水稀釋至1000ml)-甲醇(95 : 5)為流動(dòng)相;檢測波長為220nm。取阿莫西林混合雜質(zhì)對照品5mg,用阿莫西林和克拉維酸鉀混合對照品溶液50ml溶解后,進(jìn)樣測試,色譜圖中阿莫西林峰與前相鄰阿莫西林酸峰之間的分離度應(yīng)符合要求,理論板數(shù)按阿莫西林峰計(jì)算不低于2000。
測定法 取本品10片,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于1片的平均重量),加水適量,超聲使溶解并定量稀釋制成每1ml中含阿莫西林0.5mg的溶液,濾過,立即精密量取續(xù)濾液20μl,注入液相色譜儀,記錄色譜圖;另分別精密稱取阿莫西林對照品與克拉維酸對照品各適量,加水溶解并定量稀釋制成與供試品溶液濃度相同的混合溶液,同法測定。按外標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算供試品中C16H19N3O5S和C8H9NO5的含量。
[增訂]
【鑒別】 [1] 在含量測定項(xiàng)下記錄的色譜圖中,供試品溶液兩個(gè)主峰的保留時(shí)間應(yīng)分別與對照品溶液相應(yīng)兩個(gè)主峰的保留時(shí)間一致。
[2] (1) 取本品1片,研細(xì),加pH7.0磷酸鹽緩沖液溶解(必要時(shí)冰浴超聲助溶10分鐘)制成每1ml中約含阿莫西林5mg的溶液,靜置,濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液;取阿莫西林對照品與克拉維酸對照品各適量,加pH7.0磷酸鹽緩沖液溶解(必要時(shí)超聲助溶10分鐘,其中克拉維酸待超聲后加入)制成每1ml中分別約含阿莫西林5mg和克拉維酸2mg的溶液,作為對照品溶液;另取阿莫西林對照品、克拉維酸對照品和頭孢克洛對照品各適量,加pH7.0磷酸鹽緩沖液溶解(必要時(shí)超聲助溶10分鐘,其中克拉維酸待超聲后加入)制成每1ml中分別含阿莫西林、克拉維酸和頭孢克洛各約5mg的溶液,作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液。照薄層色譜法(附錄V B)試驗(yàn),吸取上述3種溶液各2ml,分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上,以乙酸乙酯-乙醚-二氯甲烷-甲酸(5 : 4 : 5 : 4)為展開劑,展開,徹底(充分)晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液中阿莫西林、克拉維酸和頭孢克洛應(yīng)顯三個(gè)清晰分離的斑點(diǎn);供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的熒光和位置應(yīng)與對照品溶液主斑點(diǎn)的熒光和位置相同。
(2) 取(1)項(xiàng)下的供試品溶液1ml,加鹽酸羥胺試液1ml,振搖,加酸性硫酸鐵銨試液1滴,搖勻,即顯深紅色。
(3) 取(1)項(xiàng)下的供試品溶液1ml,加堿性酒石酸銅試液0.5ml,搖勻,溶液顏色應(yīng)由深葡萄紫色變?yōu)樯钅G色。
(4) 取(1)項(xiàng)下的供試品溶液1ml,加三氯化鐵試液3滴,搖勻,即顯淺棕黃色。
以上[2]法僅用于快檢。 |